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FITC標(biāo)記牛血清白蛋白標(biāo)定方法

發(fā)布時(shí)間: 2020-10-29  點(diǎn)擊次數(shù): 881次

FITC標(biāo)記牛血清白蛋白標(biāo)定方法


牛血清白蛋白(BSA),是牛血清中的一種球蛋白,包含607個(gè)氨基酸殘基,分子量為66.446KDa,等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用。


牛血清中的簡(jiǎn)單蛋白,是血液的主要成分(38g/1000ml),分子量68kD。等電點(diǎn)4.8。含氮量16%,含糖量0.08%。僅含己糖和己糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581個(gè)氨基酸殘基組成,其中35個(gè)半胱氨酸組成17個(gè)二硫鍵,在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽(yáng)離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營(yíng)養(yǎng)作用。在動(dòng)物細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。牛血清白蛋白(BSA),又稱(chēng)第五組分,是牛血清中的一種球蛋白,包含583個(gè)氨基酸殘基,分子量為66.430 Da,等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用,例如在western blot中作為Blocking agent。

 

標(biāo)記材料:

1、異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)異構(gòu)體I(isomer I),來(lái)源于sigma,MW:389.4,激發(fā)波長(zhǎng) 493nm,發(fā)射波長(zhǎng) 550nm。

2、牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin ,BSA),進(jìn)口分裝,MW: ~68000,純度98%。

3、標(biāo)記緩沖液:0.5M pH9.5 CB(碳酸鹽緩沖液),洗脫液:0.01M pH7.2 PBS。

標(biāo)記方法:

直接標(biāo)記法:RT 2.5-3.0hs,離心后過(guò)Sephadex G-50,0.01M pH7.2 PBS洗柱。

質(zhì)量分析:

溶液為0.01M pH7.2 PBS(含0.03%proclin,50%甘油),蛋白濃度為5mg/ml左右,F(xiàn)ITC濃度為30-45ug/ml,含有防腐劑。

FITC標(biāo)記牛血清白蛋白進(jìn)口分裝,現(xiàn)貨供應(yīng)

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