更明智的避免RNase污染措施包括以下幾個方面
許多實驗由于RNase的污染導致了不必要的失敗。然而,外源性RNase問題可以通過小心采取預防措施和謹慎應用常識來*避免。在我們的經(jīng)驗中,頻繁出現(xiàn)的外源性RNase污染有兩個來源。
1.被污染的緩沖液。由于粗心的無菌操作,使緩沖液被細菌或其他微生物污染。這些微生物的生長通常是肉眼不可見的,不需要等到大量繁殖就足以引起問題。因為RNase不能通過高壓滅菌去除,因此被污染或懷疑被污染的溶液必須丟棄。
2.自動移液器。如果自動移液器先前用于分配含有RNase的溶液,再使用無RNase的一次性吸頭就沒有意義了(例如,在小規(guī)模質(zhì)粒制備過程中,更糟的是進行核糖核酸酶保護性分析中)。如果自動移液器的槍管和金屬槍栓接觸試管壁,它就成為散RNase的非常有效的載體。對使用橡膠手套可以避免RNase問題的迷信已經(jīng)在許多實驗室扎根。然而事實并非如此,依賴手套并不可靠。首先,研究者的頭發(fā)和胡須更容易成為罪魁禍首,更重要的是,手套只有在與皮膚表面接觸前能提供有效的保護。即使每接觸一次儀器設備都更換一次手套,也未必有用,像打開冰箱、填充冰桶、填寫實驗記錄和稱量試劑。這既不明智也不好操作。戴上手套,但要不迷信它可以防止RNase。
●當處理RNA時保證自動移液器。
●將要用于RNA實驗的玻璃器皿、塑料制品和緩沖液留出來。
●分成小份保存溶液和緩沖液,并將每小包裝用后丟棄。避免使用已經(jīng)在實驗室中用于其他目的的材料和溶液。留出專門的電泳裝置用于分離RNA。這些裝置要用去污劑清洗,流水沖洗,乙醇沖洗干燥,之后充滿3%過氧化氫,室溫放置10min后,用DEPC處理過的水*沖洗電泳槽。
●用無RNase的玻璃器皿、DEPC處理過的水準備所有的溶液和緩沖液,用于RNA實驗的化學藥品要用一次性藥匙或者敲擊試劑瓶的方式取用??赡艿脑挘?.1%的DEPC在37℃處理溶液至少1h,之后在15 psi (1.05kg/cm2 )高壓滅菌15min。
●高壓滅 菌的玻璃器皿和塑料制品不能有效地滅活RNase。玻璃器皿可以在300°C烘烤4h,塑料制品可以用DEPC處理,或者用商業(yè)化的產(chǎn)品滅活上面的RNase。
●用聲譽好的廠家的無RNase一次性移液器吸頭和微量離心管。為了減少污染的機會,用無菌鑷子從原包裝中取這些耗材放置于實驗架上。
信帆生物公司主要代理產(chǎn)品:
elisa試劑盒:進口ELISA試劑盒,國產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒等。
培養(yǎng)基:微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等。
血清:胎牛血清,人血清,動物血清,NQBB,Hyclone,Gbico原裝血清 。
生物試劑:Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進口試劑。
標準品對照品:進口對照品,進口對照藥材,進口標準品.
抗體:一抗,二抗,流式抗體等。
放免試劑盒:進口放免試劑盒,國產(chǎn)放免試劑盒,進口美國鳳凰等放免試劑盒。
實驗室代測服務:放免代測,WB實驗,免疫組化代測,熒光定量PCR代測,病理細胞染色代測,生化實驗代測等。
更明智的避免RNase污染措施包括以下幾個方面